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Hacat人永生化角质形成细胞 HZ-5680HC

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¥ 1350.00 /培养瓶
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Hacat人永生化角质形成细胞 


一、Hacat细胞基本属性

细胞名称

Hacat(人永生化角质形成细胞)(STR鉴定正确)

细胞别称

HaCAT; HACAT; Hacat

细胞货号

HZ-5680HC

来源

皮肤;自发永生;男性;62岁

细胞形态

上皮细胞样

细胞类型

正常细胞

生长特性

贴壁细胞

生物安全等级

1

培养条件

DMEM+10% FBS+1% P/S

培养环境

空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介

Hacat细胞来源于一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,是在体外培养后自然转化的永生化的人角质细胞,也是第一株永生化的表皮细胞。Hacat细胞角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性,可用于人表皮细胞角化的研究。

二、Hacat细胞培养操作

换液周期

2-3天

培养基体积

T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

传代比例

1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法

1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、Hacat细胞冻存操作

冻存液配方

92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格

200-300万/ml,1ml每管

冻存方法

1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项

冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案


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