货号:HZ0030
规格:100T
保存:BSA 蛋白标准品 2-8℃保存有效期至少 3 个月,-20℃保存有效期至少一年,其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存,Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。
产品组成:
Folin 酚甲试剂 A | 100ml ×2 |
Folin 酚甲试剂 B | 5ml |
Folin 酚乙试剂(1N) | 20ml |
PBS 稀释液 | 30ml |
BSA 蛋白标准品 (5mg/ml ) | 1ml |
产品说明:
Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质铜络合物;第二步是此络合物将Folin 试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5^500μg/ml蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
操作说明:
1.根据需要量,取适量Folin 酚甲试剂A和B按50:1 混合,混合后有效期为24小时,过期失效。
2.根据需要量,取适量BSA标准品用PBS稀释稀释10 倍至浓度0.5mg/ml。
若采用酶标仪法(96孔)
3.将标准品按0,2,4,6,8, 12, 16, 20ul加到96孔板中,加PBS补足到20ul。
4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度),加20ul 到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2 后。
5.将配好的Folin 酚甲试剂每孔加入200ul, 轻轻震动,混匀,室温放置10 分钟。
6.各孔加入20微升Folin 酚乙试剂,迅速混匀,37C放置30分钟。用酶标仪测定A650 计算蛋白浓度。
若采用分光光度计法(接 上述步骤2)
3.取八支(或者更多) 5ml 离心管,标号,按下表加入试剂。
4.混匀,37°C放置30分钟。分光光度计测定A650 计算蛋白浓度。