产品描述

Matrigel Matrix LDEV-Free基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出来的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包含生长因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵袭和基因表达等的研究。

基质胶形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、塞尔托利氏细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。Matrigel能影响成鼠肝脏细胞和人乳腺上皮细胞三维培养物的基因表达。同时，Matrigel可用作多种肿瘤细胞侵袭研究的基本支架，体内外血管新生研究的基质，以及体内动物模型移植瘤细胞生长的三维支架。Matrigel还能支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。

浓度为8~20 mg/mL，满足多种实验要求，包括：血管生成研究和肿瘤细胞迁移。

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期两年。

产品应用

1. Matrigel基底膜/基质胶的融化与保存

特别注意：Matrigel对温度非常敏感，千万不可多次重复冻融。Matrigel的分装以及凝胶前的准备过程中都必须在冰上（4℃）操作，因为温度稍微提高，都很可能出现成胶现象，从而导致基质胶不均匀或者影响后续的凝胶。用来盛放的试管或者分装的枪头都必须进行预冷。

a）收到产品后，如果暂时不使用，请整瓶直接放到-20℃冻存（不要放在无霜冰箱内）。

b）将整瓶Matrigel放入冰盒内再放到4℃过夜，使其充分融解。建议：在4℃ 14000 rpm离心20 min，小心吸取上清。

2. Matrigel基底膜/基质胶的使用特别注意

基质胶在22-35℃能够快速成胶。为了保证Matrigel基质胶的成胶性能与稳定性，Z终稀释浓度不应低于3 mg/mL（Matrigel原液的浓度因批次不同有差异）。可用无血清培养基来稀释Matrigel，稀释后需要立即使用。

A. 薄胶制备方法

1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrigel基质胶。

2）将需要使用的培养板置于冰上，按50 μL/cm2生长面积的浓度加入Matrigel基质胶。

3）在37℃放置30分钟，此时平板即可使用。

B. 厚胶制备方法

1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrigel基质胶。

2）将需要使用的培养板置于冰上，将培养的细胞与Matrigel基质胶混合，用遇冷的枪头使细胞悬浮均匀。按照150-200 μL/cm2生长面积的浓度加入Matrigel基质胶。

3）在37℃放置30分钟，此时即可加入细胞培养液。细胞也可生长在此厚胶的上层。

C．薄层包被方法

1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrigel基质胶。

2）采用无血清培养基稀释Matrigel基质胶到需要的浓度。建议根据具体的实验做个梯度实验，从而确定的包被浓度。

3）将稀释的Matrigel基质胶加入需要包被的培养器皿中，包被量至少覆盖细胞的所有生长表面。室温下孵育1小时。

4）去除未凝固结合的Matrigel基质胶，用无血清培养基轻轻地冲洗。此时平板即可使用。

注意：Matrigel基底膜/基质胶包被的平板当天使用，但也可根据具体应用调整。包被好的平板加入培养基后，在37℃可存放1周。

产品特性

Matrigel基质胶会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5% CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。

细胞可在0.5 mm厚度的Matrigel基质层表面生长，也可在1 mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。

（注意：可将融化后的Matrigel分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。）

Matrigel在22-35℃温度环境下快速成胶，因此融化时在4℃冰上过夜解冻（4℃时会随着温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Matrigel。成胶后的Matrigel可以在4℃ 24－48小时后重新呈液态。

注意事项

1. 产品的分装、使用等操作需在无菌环境下进行，与产品接触的实验器材（如：枪头、产品管等）使用前需预冷。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、本产品仅用于科学研究使用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用