细胞STR鉴定技术服务

研究背景

细胞系错误鉴定问题已有50年历史，基于国际细胞库的分析数据显示：1984年细胞错误鉴定率为35%，1999年为18%，直到最近几年，应用于生物医学领域的细胞系需要鉴定的问题仍然很少有人关注。

近年来，大量研究表明 STR 基因分型 方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一，STR基因分型应用于细胞鉴定已被ATCC等机构强烈推荐。美国的ATCC 细胞库、德国的DSMZ细胞库以及日本的JCRB细胞库等为STR 分型提供了各细胞株的数据供比对。

技术简介

STR ( Short Tandem Repeat, 短串联重复序列)基因分型技术是细胞身份鉴定最准确有效的方法，被ATCC、ICLAC等权威机构认定为细胞鉴定的金标准。STR基因位点由长度为3~ 7个碱基对的短串连重复序列组成，广泛存在于人类基因组中，被称为细胞的DNA指纹。通过对这些STR位点的检测，将检查结果与专业的STR数据库比对，从而确定被测细胞的真实身份，或判断被测细胞是否与某些细胞，发生交叉污染。

人源细胞STR分型(cell line STR genotyping),是选用D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、PentaD、vWA、D8S1179、TPOX、PentaE、TH01、D12S391、D2S1338和FGA等19个具有高度多态性基因座和一个性别基因位点Amelogenin对人源细胞进行STR分型检测。根据STR分型结果对细胞的生长状态(是否存在交叉污染)和细胞的株系进行确认的技术手段。

为什么需要做细胞STR鉴定

细胞系错误鉴定所造成的后果

► 细胞系的损失

► 时间和金钱的损失

► 在公众领域(文献、专利等)提供错误信息

► 造成实验结果不一致或不可重复

何时需做细胞STR鉴定

►发表文章或申请课题经费前

►使用细胞进行临床治疗(试验)前

►准备冻存保种或已冻存多年的细胞

►一个涉及到细胞试验项目开始/结束时

►新得到的细胞或实验室传5代以上的细胞

►细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大

►文章发表或常规定期鉴定

周期报价

周期：1 周

报价：800 元/样

检测流程

1.确定STR位点，设计实验方案，包括荧光标记的选择，引物的设计、合成和标记，荧光分子量内标的选用等。

2.按照所设计的实验方案完成荧光PCR，利用琼脂糖电泳检测结果;若PCR产物特异性不够，将进行优化。

3.PCR产物通过ABI 3730XL测序仪器进行毛细管电泳检测，获得扩增片段大小的数据

4.用GeneScan 3.0/GenoTyper 2.0或GeneMapper 3.2等软件对收集到的数据进行处理分析，将产物片段大小、数量多少的信息转化成直观准确的波形图谱，为下一步进行关联分析或连锁分析等遗传分析提供可靠的数据。

服务内容

细胞收集，基因组DNA提取

荧光弓|物PCR扩增21个str位点

产物经测序仪电泳，获得细胞基因分型结果

结果与ATCC、DSMZ、JCRB和RIKEN等细胞库比对和分析

样品要求

1. PCR产物或基因组DNA：浓度≥200ng/ul，总体积≥20ul，OD260/280在1.7至2.0之间;新鲜组织样品：总量≥100mg的新鲜组织样品或1～2ml血液样品

2. PCR产物或基因组DNA请提供样品的电泳检测图

3. 由于在实验过程中，可能会出现某些STR位点难以检测的情况，建议提供3～4个备选STR位点

4. 建议使用6FAM, VIC, NED以及PET四种荧光标记

5. 为尽量避免多种荧光信号的相互干扰，不建议同管检测使用的荧光多于2种，多种荧光同管检测，PCR产物大小需相差50bp以上

6. STR检测中常会出现一些比正常产物短2～4个碱基的峰，这是由截断PCR造成的，属于正常现象，并不会影响实验结果的分析。

您的细胞系认证服务 STR 概况报告包含

简单易懂的STR等位基因表

支持每个位点的等位基因调用的电泳图

结果的综合解释

STR 分型图谱和细胞鉴定结果的书面报告 (中英文报告)

公司优势

通用荧光引物，大幅降低3730实验成本

提供21个str位点选择，极大提高鉴定的分辨率

数据分析基于3730测序平台，结果稳定可靠

可提供英文报告，用于文章发表

实验周期短，价格优惠，售后服务完善

本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用！