支原体污染检测技术服务

技术简介

支原体，直径在0.1-0.3μm，是目前发现的最小的最简单的原核生物，可以轻松地通过滤膜，混入培养系统中，呈高度多形性形态。支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物，能够抑制细胞代谢和生长，改变核酸合成，影响细胞抗原性，导致染色体改变等。因此每一株外来细胞都应进行支原体检测，并且应对培养中的细胞进行定期支原体检测。本实验室采用PCR检测法鉴定支原体污染现象，并用专门的试剂进行清除。

为什么要做支原体污染清除与检测

当实验室建立新的细胞系 ，细胞功能不正常，文章发表，国外期刊杂志要求，细胞冻存之前或实验室细胞常规定期检测时，需要进行支原体污染检测。从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。以细胞为载体的科学研究，如果不能保证所用的细胞无支原体污染，则实验结果很可能是极端不可靠甚至是完全错误的。

支原体具有变形能力，可透过常见过滤膜(0.22-0.45 μm)，因此常规的无菌过滤方法不能将其去除，常用的抗生素也对支原体无效。支原体污染是细胞培养领域的一个世界性问题，世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体可通过细胞之间交叉污染，操作人员的口腔、皮肤造成污染，或者血清等添加物而带入污染。

支原体在光学显微镜下不可见，一般不会引起培养物混浊，因此细胞被支原体污染一般难以察觉。支原体会消耗必须氨基酸，影响细胞生长速率，促进代谢物积累，改变细胞形态，影响 DNA、RNA 以及蛋白质的合成，抑制细胞因子表达，改变被污染细胞的基因表达谱，诱导染色体畸变。

操作流程

服务对象

实验室的种子细胞，如从ATCC、JCRB、DMSZ等国外权威细胞库采购的珍贵细胞系；

组织珍贵的原代细胞；

需要进行基因编辑的细胞；

各类干细胞(含iPS细胞)；

稀有细胞

服务内容

根据客户提供的细胞名称、细胞代次、细胞类型制定细胞的支原体清除方案

根据支原体特异性基因设计引|物，PCR法检测支原体污染程度

提供完整的实验报告 (中英文报告)、原始图片和无支原体污染的细胞

样本运输要求

细胞悬液：用T25培养瓶培养活细胞一瓶，细胞融合度50-60%,充满培养基，标明细胞名称，常温运输。

冻存细胞：收集活细胞沉淀，加入1ml冻存液,用2ml无菌冻存管保存,标明细胞名称，干冰运输

细胞支原体污染检测技术服务委托单

本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用！