腺苷三磷酸（ATP adenosine triphosphate）是由腺嘌呤、核糖和3个磷酸基团连接而成，水解时释放出能量较多，是生物体内最直接的能量来源。ATP发光法，是通过检测细胞内ATP含量来分析细胞活性及增殖的。常见的ATP发光法是利用外源萤火虫荧光素/荧光素酶与细胞内的ATP发生氧化反应而产生光子，通过监测光度来检测ATP含量，从而分析细胞活性与增殖。

原理图：

优点：灵敏、快速、便捷、稳定，同时可以把ATP数量化，用相对光强度（RLU）来进行定量。

在所有现有的荧光染料中，荧光素二乙酸酯（FDA）及其衍生物（如CFSE）是非荧光分子，其扩散到细胞中并被细胞内非特异性酯酶水解以产生荧光。荧光产物仅在具有完整细胞膜和活性酯酶活性的细胞中产生和积累,荧光产物会跟随细胞分裂，被平均分配到子细胞中。进一步可用流式细胞仪分析细胞分裂增殖的情况，还可以通过细胞完整性对活死细胞分别进行标记。

优点：活体标记、简单、稳定、荧光时间长

CCK-8检测是一种基于 SST-8 的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测。其主要成分为水溶性四唑盐 SST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，SST-8 是一种类似于 MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜。SST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

优点：

1.CCK-8法产生的甲臜是水溶性的，不仅省去了溶解步骤，更因此而减少了该操作步骤带来的误差。.MTT实验生成的甲臜不是水溶性的，需要使用 DMSO 等有机溶剂溶解。

2.线性范围更宽，灵敏度更高。

3.对细胞无毒性，可以多次测定，选取最佳测定时间。

4.所用试剂在培养基中比 MTT 更加稳定，实验结果重复性好。

5.MTT 具有毒性，同时其生成的甲臜需要有机溶剂溶解，会对操作人员身体造成危害。

台盼蓝染料是一种重要的染色剂，可以将死组织或死细胞染成蓝色而具有完整细胞膜的活细胞或组织却不着色。由于细胞在通过膜的化合物中具有很高的选择性，因此在活细胞中，台盼蓝不被吸收; 然而，它可以穿过死细胞中的膜。因此，死细胞在显微镜下显示为独特的蓝色。

优点：用于辨别区分死细胞和活细胞，以及检测细胞膜的完整性。