细胞培养中遇到细胞空泡化怎么办?
1、细胞老化:细胞处于终末分化状态,或细胞传代次数过多,老化严重。
2、pH值:培养液的pH值与细胞正常所需pH值差别太大。
3、胰酶消化:胰酶消化时间过长或消化细胞吹打时力度过大。
4、自噬:细胞缺乏营养导致饥饿,诱导形成自噬。
5、细胞代谢:血清浓度不够,药物作用、外界刺激等导致细胞代谢出现问题。
6、污染:衣原体感染、支原体污染、病毒污染。
重点来了,怎么处理?具体问题具体分析。
1、若是因为细胞老化,可复苏代数靠前的细胞进行培养。
2、若是pH更换,培养液调整到合适的pH值。
3、传代时,胰酶的浓度合适,选取适当的消化时间进行消化,避免吹打太过用力
4、保证细胞培养的营养充足。可通过增加血清浓度和在培养基中加入谷氨酰胺。
5、严格进行无菌操作。尽量使用质量好和渠道正规的胎牛血清。