做实验最怕的是什么?
早起抢仪器?
熬夜写报告?
放假看文献?
都不是! 最怕的是—— 辛辛苦苦做了很久的实验, 到最后才发现买的试剂盒居然是假的 那才叫一夜回到解放前 我们阅读大量的文献 精心设计实验课题 事无巨细的实验流程 这一切的努力就是为了 有一个满意的实验结果 可是,每当实验结果出现偏差 我们大都只会反复检查样品、模板、引物序列等 很少有人会质疑购买的试剂产品 尤其是那些进口、知名品牌的产品 然而,假冒产品无处不在 在国内生物研讨蓬勃发展的如今,冒充无视科学研讨的谨慎性和严肃性,让广阔的科研工作者被迫造假,严重破坏了科研空气,扰乱了市场秩序,沪震生物整理了一些辨别这些冒充伪劣ELISA试剂盒的办法,供广阔的科研工作者和用户参考,让期望对广阔科研工作者有所协助。 事实上无论在国内还是在国外,都会存在假冒伪劣产品,我们要擦亮眼睛学会鉴别,假不乱真,假货的出现和传播也同样有它的内在规律,以下是假试剂常见的现象,希望大家以后尽量避免买到假货。 1.抗体的有效性用 重组蛋白生产的抗体不一定会和天然蛋白有效结合,必须用生物体中的蛋白去验证重组蛋白生产的看题的有效性; 2.稀释真品 想掺水的假酒一样,不良商家将一份抗体稀释成五份销售,使抗体效价下降,与说明书标注的严重不符,这是试剂造假中惯用的小伎俩; 3.进口分装 正规品牌为了保证产品质量和品质的稳定性,不会搞出口分装,因为试剂盒中试剂都是一一对应的,很难给分装试剂的空间,如果是进口分装,十有八九是假货; 4.滥竽充数,以次充好 不法商贩以一些来历不明的试剂以次充好,瓶子是回收的,质量无法保证, 5.无同源性指标出现相似的标准品数值 两个不同甚至没有序列同源性的试剂盒,经历了交叉实验后,标准品数值相似甚至相同,那么必定是假货无疑了; 6.检查种属 用不同种属的试剂盒替代,由于同一种蛋白有一定同源性,实验结果的准确性可能会差一点 7.替换指标,真假混卖 用TGFβ以假乱真,TGFβ是在大多数哺乳类动物中广泛表达的物质,其种属间抗原的氨基酸序列同源性达到100%,但在实验中会随其他因子影响而导致表达水平发生相应变化,这些变化很难被察觉,有了这些万能指标,公司就能以假乱真。 面对这一个假货横行的市场,该如何鉴别ELISA试剂盒的真假? 采购前 采购后 1.假如采购了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,使用穿插试验即可辨别ELISA试剂盒是不是造假,办法如下: (1) 取出采购的试剂盒A的包被板两条。 (2) 一条包被板加试剂盒A的规范品做规范曲线。 (3) 另一条包被板加试剂盒B的规范品做规范曲线。 (4) 后续操作依照试剂盒阐明书进行,加检查抗体、酶复合物和底物。 (5) 试验结束后,检查两条规范曲线,假如两条规范曲线共同则阐明两个ELISA试剂盒检查的同一个目标而非A和B,即该试剂盒为伪劣编造ELISA试剂盒。 (6) 假如两条规范曲线不共同则阐明两个ELISA试剂盒检查的不一样目标,试剂盒A只能检查A,不能检查B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。 2. 使用搅扰试验即可辨别ELISA试剂盒是不是检查意图抗原,办法如下: (1) 将对于试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检查抗体装备成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液 (2) 37℃孵育15分钟后,替代原试剂盒中的检查抗体 (3) 后续操作依照试剂盒阐明书进行,加检查抗体、酶复合物和底物 (4) 试验结束后,检查其规范曲线,假如规范曲线良好则阐明参加的意图抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检查抗体对于的对错意图抗原,该试剂盒为伪劣编造ELISA试剂盒。 (5) 假如规范曲线无线性,则阐明试剂盒检查抗体已被意图抗原中和或搅扰,影响了其实践试剂盒抗体的检查效果,则该试剂盒检查抗体对于的是意图抗原。 用假冒伪劣的ELISA试剂盒坑害广大的科研工作者,他们往往唯利是图,无视科学研究的严谨性和严肃性,让广大的科研工作者被动造假,严重扰乱了科研工作,