荧光原位杂交

技术简介

原位杂交(in situ hybridization)是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。与传统的放射性标记原位杂交相比，荧光原位杂交具有快速、检测信号强、杂交特异性高和可以多重染色等特点。广泛应用于染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究等许多领域。

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)则是在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记的原位杂交方法，是利用荧光标记的DNA探针来检测在细胞、组织和肿瘤的特定DNA序列的分子诊断技术。首先将样本DNA变性，加入特定的荧光标记的探针与变性的样本混合进行杂交，退火得到双链DNA。探针信号能够被荧光显微镜捕获，从而定性、定量地检测目标DNA。与其它用于研究染色体的技术不同，FISH操作灵活，不需要在正在分裂的细胞进行检测，因而能够用来检测基因或染色体是否异常，通常用于遗传咨询，医学和品种鉴定、DNA特定功能研究。利用FISH方法还可检测非整倍体，微缺失综合征以及基因重排等，这些指标对遗传性疾病，如白血病，淋巴瘤，实体瘤，自闭症等发育综合征有重要的临床意义。

实验原理

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法，具有安全、快速、灵敏度高、探针保存时间长、能同时显示多种颜色等优点。

实验流程

1. 根据客户送的样本(固定好或者包埋好)，以及样本类型，安排实验

2. 包埋或者切片后，根据客户所测指标，设计特异性探针，标记示踪物。然后进行一系列反应

3. (可选)根据上述所做好的切片进行拍片，分为荧光显微镜(激光共聚焦显微镜)或普通光学显微镜

4. (可选)针对做好的玻片进行分析，分析时选取较好的区域，分析三个视野

5. 提供实验报告：包括详细的实验方法及原位杂交实验结果的相关图表

周期报价

周期：1-2 周

价格：400 元/张

荧光原位杂交的优势

高度特异性

极高信噪比

可对多种形式的样本进行检测

一张片上展现多种RNA/DNA分子的表达分布和相对丰度

客户提供

待测样本信息

待测目的基因序列，GeneID或者Accession Number等

样本量信息及检测要求等

样本运输要求

冰冻切片：标本放原位杂交固定液中，常温运输;冰冻切片-20℃运输

石蜡切片：标本放原位杂交固定液中，常温运输;石蜡切片常温运输

细胞爬片：细胞爬片加原位杂交固定液固定15min后，密封，-20℃运输

新鲜组织：组织取出后可以立即冷冻处理，后干冰运输

样品制备

我们为多个FISH应用建立了实验方案以增强灵敏度和信号，包括：

细胞染色体FISH(间期，中期和培养的细胞)

组织染色体FISH(福尔马林固定的、石蜡包埋组织切片或细胞玻片)

RNA-FISH(细胞内RNA定位，RNA加工，定量)

本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用！