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YF® 640 Tyramide Kit, HRP Goat anti-rabbit IgG
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产品概述：
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见表Tyramide Stock Solution, 200× | 100 µL |
见表HRP-conjugated secondary antibody | 100 µL |
BSA | 2 g |
1× Tyramide Amplification Buffer | 20 mL |
表 2: 试剂盒组分编号
标记染料 | HRP-conjugated secondary antibody | Goat anti-mouse IgG | Streptavidin | ||
®347/448 | 60009 | 60001 | |||
®490/515 | 60009 | 60002 | |||
®555/565 | 60009 | 60003 | |||
®593/614 | 60009 | 60004 | |||
®642/662 | 60009 | 60005 | |||
®681/698 | 60009 | 60006 | |||
~ | 60009 | 60007 |
1. 1× Tyramide Amplification Buffer 首次使用后，建议小量分装，-20℃保存，避免反复冻融。
2. 与荧光二抗相比，Tyramide 试剂盒显示出更高的灵敏度和更强的信号。因此，实验时一抗的使用浓度较低，这样可以降低非特异性结合带来的背景荧光，我们建议梯度设置一抗浓度以找到最佳浓度。
3. 如果需要考虑背景荧光，建议设置未与一抗孵育的阴性对照。确保该阴性对照在孵育和洗涤过程中没有被阳性样品中的试剂交叉污染。对于组织样品，我们还建议对未染色的对照（不添加抗体或酪酰胺）进行成像，以确定组织自发荧光对背景的影响。
4. 建议使用 5 μg / mL 的 HRP 结合物，降低浓度可能会影 响信号强度和灵敏度。
5. 建议 1：200 稀释 YF / Biotin-Tyramide。较高的浓度可能会导致信号过强或背景高，可以从 1：100 到 1：1000 摸索以找到最佳浓度。
6. 可以在每个酪酰胺反应后通过进行 HRP 淬灭或抗体剥离，依次使用多个酪酰胺扩增试剂盒来标记同一样品上的不同靶标。