RealSafe Green核酸染色剂/核酸染料
● 简介:
RealSafe是一种可以替代溴化乙锭(EB)的荧光核酸染色剂。与核酸结合后,RealSafe的荧光激发波长在280和502nm,最大发射波长在530nm。与SYBR或EB相比,RealSafe具有以下特点:
1 诱导突变的能力极低,使用更安全。
2 稳定性高:可以用微波炉直接加热,使用方便。
3 对核酸量不敏感,不会出现条带弯曲现象。
4 使用范围广:预染法和后染法都能使用;紫外和蓝光仪下都能观察;DNA和RNA都能染色。
● RealSafe的使用方法:
注意:染料使用前应在常温下彻底融化混匀后使用。
1 RealSafe预染方法
1.1 将RealSafe 10000×in DMSO(货号:GS001)按1:10000加入到1×TAE或0.5×TBE中(例如:将5ul RealSafe 试剂加入到50ml 电泳缓冲液中),加入琼脂糖,充分混匀,用微波炉加热融化凝胶。如使用RealSafe in TAE buffer(货号:GS002)或RealSafe in TBE buffer(货号:GS003),直接取适量体积的缓冲液加入琼脂糖,充分混匀,用微波炉加热融化凝胶。
1.2 浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。
1.3 紫外或蓝光下观察结果。
2 RealSafe后染方法
2.1 用1×TAE或0.5×TBE将RealSafe 10000×in DMSO(货号:GS001)稀释制成1X染色溶液。(例如:将10 μl RealSafe加入到100ml 1×TAE或0.5×TBE中)。如使用RealSafe in TAE buffer(货号:GS002)或RealSafe in TBE buffer(货号:GS003),直接取适量体积的缓冲液直接使用。
2.2 将凝胶小心地放入合适的聚丙烯容器中,加入适量的染色溶液浸没凝胶。
注:由于RealSafe对光敏感,建议用铝箔纸把容器包裹好。不要使用玻璃器皿,容易吸附染料。
2.3 轻轻地摇动凝胶板,最佳的染胶时间为30 分钟,这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚丙烯酰胺的浓度和 DNA 的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高,染色所需要的时间就越长。染色后可以直接观察,不需要脱色。
2.4 紫外或蓝光下观察结果。