RealSafe Gold核酸染色剂
● 简介:
RealSafe®Gold是一种可以替代溴化乙锭(EB)的绿色荧光核酸染色剂,与SYBR Gold是类似产品。与SYBR或EB相比,RealSafe®Gold最显著的特性是其在多种条件下的高灵敏性和稳定性。另外,与RealSafe Red相比,RealSafe Gold在蓝光仪下条带更清晰。同时,相对EB或SYBR,RealSafe®Gold诱导突变的能力极低。
特点:1. 灵敏度高,小分子片段更清晰。
2. 对核酸上样量有更好的兼容性,不会出现浓度高片段弯曲现象。
3. 染料在胶中迁移度低,电泳后紫外观察不会出现阴阳胶现象。
4. 花菁素染料,安全无毒。
5. 紫外或蓝光仪下条带都清晰可见。
● 贮存:
4-8℃避光保存2年。
● RealSafe®Gold的使用方法:
注意:染料使用前应在常温下彻底融化混匀后使用。
1. RealSafe®Gold预染方法(推荐方法):
1.1 将RealSafe®Gold试剂按1:10000溶于琼脂糖凝胶溶液中,充分混匀。(例如:将5 μl RealSafe®Gold 试剂加入到50 ml 凝胶溶液中)。注:由于RealSafe®Gold 具有出色的热稳定性,可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中,而不用等凝胶溶液冷却后再加入。
1.2 浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。
注意:使用这种预先加入染色剂的琼脂糖凝胶,每次不易加入太多的 DNA 样品,否则容易造成饱和现象,可以做多个不同浓度的 DNA Marker,以确定最佳 DNA 上样量。
1.3 紫外下观察结果。
注:如果始终出现拖尾或是条带无法分离的现象,您可以使用后染法对DNA染色,以确认问题是否与染色剂有关。如果使用后染法问题依旧存在,则说明问题与染色剂无关,请尝试减少核酸的上样量后进行电泳。
2. RealSafe®Gold后染方法:
2.1 用H2O将RealSafe®Gold稀释约3,300倍,制成3X染色溶液。(例如:将15 μl RealSafe®Gold加入到45 ml H2O中)。
2.2 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3X染色溶液浸没凝胶。
2.3 在常温下轻轻地摇动凝胶板,最佳的染胶时间为30 分钟,这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚丙烯酰胺的浓度和 DNA 的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高,染色所需要的时间就越长。
注:染色溶液至少可重复使用2-3次。如果不是立即再用的话,建议将用过的染色溶液冷藏保存。
2.4 紫外下观察结果。