RNAplant植物RNA提取试剂(多糖多酚植物)
产品简介:
RNAplant试剂可从植物组织,特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎,白松松针或嫩苗,和西红柿叶等)提取高纯度的总RNA。
每100 ml可处理100 mg组织200次。
保存条件:室温运输,4℃保存,可保存6-12个月。
准备试剂:液氮,研钵,无RNase离心管,5 M NaCl(NC1050F 5M 氯化钠 RNase-free,DNase-free),氯仿,异丙醇,75%乙醇(无RNase水配制),无RNase水。
小规模提取操作步骤:(样品<0.1 g ,使用小规模提取方法):
1. 取不多于0.1 g植物组织,在液氮中研碎,转移到1.5 ml 离心管中,加0.5 ml提取试剂,振荡至彻底混匀。
注:振荡不要太剧烈,否则容易导致基因组DNA污染。
2. 室温放置5分钟。
3. 4℃ 12, 000 rpm离心2-3分钟,上清转入新的无RNase离心管。
4. 上清中加入0.1 ml5 MNaCl(NC1050F 5M 氯化钠 RNase-free,DNase-free),温和混匀。
5. 加入0.3 ml 氯仿,上下颠倒混匀。
6. 4℃ 12,000 rpm离心10-15分钟,取上层水相转入新的无RNase离心管。
7. 加与所得水相等体积的异丙醇,混匀,室温放置10分钟。
8. 4℃ 12,000 rpm离心10-15分钟。弃掉上清,注意不要倒出沉淀。加1 ml 75%乙醇冲洗沉淀。(沉淀可能很难看见,应小心操作。)
9. 4℃ 5000-7000rpm离心3分钟。倒出液体,注意不要倒出沉淀。剩余的少量液体短暂离心,用枪头吸出,室温晾干1-2分钟至沉淀干燥。
10. 加适量无RNase水充分溶解RNA,-70℃保存。
注意事项:
RNAplant有刺激性味道,操作时请在通风处进行。