PCR产物纯化试剂盒

试剂盒内容及保存：

储存条件：

本试剂盒在室温（15–25℃）干燥条件下，可保存12个月；更长时间的保存可置于2–8℃。（注意：当低温贮存时，使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10-20分钟，以平衡溶液温度。）

产品简介：

本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统，从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段，同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp–10kb的DNA片段，回收率大于80%（<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30－50 %）。

每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10 μg。

使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

产品特点：

1 结合液PB为亮黄色，便于观察体系的pH是否合适。

2 操作快捷，单个样品操作少于10分钟。

操作步骤：

如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1 在PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液，颠倒混匀后，全部加入到吸附柱CA2中，10,000g离心30-60秒，到掉收集管中的废液，将吸附柱CA2重新放入收集管中。

注：● 如果PCR反应体系使用了石蜡油，无需去除，但要使用10倍体积的PB液。

● 如果反应体系小于50μl，用水补至50μl体系，再加入PB液。

● 如果体系体积大于700μl，请分次上柱，保证全部溶液均加入到吸附柱中。

2 向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），10,000g离心30-60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。

3 向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW，10,000g离心30-60秒，倒掉废液。

4 将离心吸附柱CA2放回收集管中，10,000g离心2分钟，尽量除去漂洗液。

注意：此步必不可少！如果漂洗液有残留，将会影响回收效率和DNA质量，进而影响下游实验；离心后将吸附柱盖子打开，室温放置2分钟，这样将有助于彻底挥发残余乙醇。

5 将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟。10,000g离心2分钟收集DNA溶液。

注意：

● 可将洗脱缓冲液EB预热到60-70℃后再加到吸附膜上，这样可以提高洗脱效率。

● CA2柱的洗脱体积不应少于20 μl，体积过小将会降低回收效率。

● 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率

6 DNA产物-20℃保存。