细胞永生化技术服务

研究背景

正常组织来源的细胞在体外培养条件下可分裂生长，但经过有限次数的传代后，就会停止增殖，发生衰老和死亡，这种现象称之为海弗利克极限。有的细胞自发或受外界因素的影响，可以从增殖衰老危机中逃离，从而拥有无限增殖的能力，该过程称之为细胞永生化。然而自发永生化的几率非常小，啮齿类动物为10-5-10-6， 而人类细胞则更为罕见， 小于10-12。通过转染技术将外源性永生化基因导入目的细胞或诱导衰老相关基因突变，可以增加永生化的发生率，从而建立稳定的永生化细胞株。

技术简介

细胞永生化(Cell immortalization)是指体外培养的细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离，从而具有增殖能力的过程。正常组织来源的细胞在通常的体外培养条件下可分裂生长，但经过有限次数的传代后，就会停止增殖，发生衰老和死亡。利用基因转染等技术将外源性永生化基因导入目的细胞内，从而建立永生化细胞株，以达到使体外培养的细胞具有增殖能力且细胞间无差异的目的。对细胞永生化进行深入研究，不只是有利于我们了解细胞增殖与衰老的分子机制，而且为探寻肿瘤治疗及器官移植的研究奠定了坚实的基础。此外，由于永生化细胞具有可以多次传代的特性，可以利用各种细胞永生化的方法使那些传代困难、增殖缓慢、容易衰老的细胞获得永生，从而为研究人员提供许多的细胞资源，为科学研究提供了良好的体外细胞模型。

哺乳动物细胞使用几种方法诱导细胞永生化。其中猿猴病毒40(SV40)T抗原和hTERT病毒诱导的细胞永生化最为简单可靠，应用广泛。

为什么要做细胞永生化

许多细胞永生化技术可以在体外为细胞系提供扩展的增殖能力，同时密切模拟体内细胞的生理学。与原代细胞不同，永生化细胞不易受复制衰老的影响，减少了重新购买和重新启动生长的需要，节省了时间和费用。

▪ 定制永生化服务产生的细胞系寿命更长，通常与原代亲本细胞相似

▪ 细胞永生化服务相结合，能够克服原代细胞有限的寿命

▪ 除了标准细胞认证测试，可以测试永生化细胞系的扩展增殖能力和从感兴趣的组织中选择表型标记(例如，hTERT的持续表达)

永生化细胞具有增殖能力，并具有与亲本组织相似或相同的基因型和表型，能够提供稳定均一、性状一致的细胞来源，其意义主要包括但不限于

►了解细胞生长规律，探索细胞衰老机制；

►体外研究细胞增殖、分化、调亡等的理想模型；

►有助于明确致癌物质的作用机制；

►体内外探究肿瘤发生机制的重要模型；

►为研究者提供更多且更丰富的细胞资源等。

操作流程

服务内容

原代细胞分离纯化

永生化基因的慢病毒制备

慢病毒感染原代细胞并进行培养

永生化混合细胞进行抗生素筛选

永生化细胞系进行端粒酶基因表达和衰老检测

服务流程

客户提供：原代细胞、干细胞、免疫细胞材料，您可以提供自主分离的特定原代细胞，也可以从我们的原代细胞产品中选择合适的目的细胞。

我们提供：建立永生化细胞株，以及提供建立方法，步骤及结果。

也可提供表型和功能的验证：永生化细胞系可以根据您的要求进行表型和功能的验证， 包括mRNA表达，蛋白质表达或功能测定。

周期：4-8 周

报价：12000 元/株

公司优势

团队拥有成套完善的技术体系，进行稳转细胞株构建

制备的永生化细胞系纯度高，无污染

提供完整并准确的鉴定方案，鉴定报告真实可靠

拥有低成本、高效率的制备模式，极大缩短生产周期

本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用！